Informace o publikaci
Sensitive electrochemical determination of unlabeled MutS protein and detection of point mutations in DNA
| Název česky | Citlivé elektrochemické stanovení neznačeného proteinu MutS a detekce bodových mutací v DNA |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2004 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | Analytical Chemistry |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Genetika a molekulární biologie |
| Klíčová slova | MEDIATED CHARGE-TRANSPORT; MODIFIED ELECTRODES; NUCLEIC-ACIDS; STRIPPING VOLTAMMETRY; BIOACTIVE PEPTIDES; MERCURY-ELECTRODES; CARBON ELECTRODES; MISMATCH REPAIR; SOLID AMALGAMS; HYBRIDIZATION |
| Popis | Tato práce popisuje elektrochemické stanovení proteinu MutS a to jednak na uhlíkové elektrodě (oxidační signály tyrosinu a tryptofanu) pomocí SWV a jednak na rtuťové elektrodě (pík H) pomocí CPSA. Na obou elektrodách byly provedeny základní elektrochemické charakterizace tohoto proteinu pomocí AdTS techniky a byly stanoveny nejnižší koncentrace, při kterých byly stanoveny limity detekce. Další část této práce byla věnována využití proteinu MutS k rozpoznání nesprávně párovaných bází v DNA. Použili jsme 30-mer duplexy DNA s různým typem nesprávného párování a ke stanovení byla využita dvoupovrchová technika, kde hybridizace DNA respektive vazba proteinu na DNA probíhá na jednom povrchu a samotné stanovení probíhá na povrchu druhém. Z výsledků vyplývá, že jsme schopni rozpoznat různé typy chybného párování bází včetně insercí/delecí v DNA a při srovnání těchto elektrochemických metod s jinými metodami, které se k detekci bodových mutací používají (např. metody fluorescenční) jsme ve velice dobré shodě co se týče typu nesprávného párování a výšky odezvy. |