Project information
Vypracování praktické úlohy věnované využití monolitických kapilárních kolon pro separace biologických vzorků

Hlavním cílem tohoto projektu je představení nových stacionárních fází na bázi monolitů v pokročilé výuce Ústavu biochemie PřF MU. Monolitické kapilární kolony se uplatňují v praktických aplikacích v kapalinové chromatografii mimo jiné při separaci proteinů. V rámci tohoto projektu budou využity pro analýzy kvasinkových lyzátů. Proteiny obsažené v lyzátech jsou amfifilní. Z tohoto důvodu budou k jejich separaci použity monolitické reverzně fázové kolony typu C4, C12 a C18 s vnitřním průměrem 320 um a délce 5-7 cm. Použití kapilárního formátu, umožňuje dávkování malého objemu lyzátu. Mobilní fáze bude obsahovat vodu a acetonitril s přídavkem kys. trifluoroctové. Eluce bude gradientová. Podmínky separace lyzátů biofilmových a nebiofilmových kvasinek budou optimalizovány a zjišťovány rozdíly mezi separacemi, tzn. budou porovnávány jejich fingerprinty. Výsledkem optimalizace bude jednoduchá, v porovnání se standardními mikrobiologickými postupy, časově nenáročná technika využitelná pro stanovení biofilm-pozitivních a negativnáích mikroorganismů v biologických vzorcích, využitelná v běžné laboratoři.