Informace o publikaci
Novel methods for β-secretase kinetic and inhibition assays with unlabelled substrates using capillary electrophoresis with various detection techniques
| Název česky | Nové metody studia kinetiky a inhibice ß-secretasy pomocí neznačených substrátů s využitím kapilární elektroforézy v kombinaci s několika detekčními technikami |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2016 |
| Druh | Konferenční abstrakty |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Popis | V naší práci představujeme novou metodu studia kinetiky a inhibice ß-secretasy s použitím neznačeného dekapeptidu, který obsahuje tak zvanou švédskou mutaci amyloidového prekurzorového proteinu, jako substrátu s využitím kapilární elektroforézy s hmotnostně-spektrometrickou detekcí. Díky nízké spotřebě vzorku a vysoké citlivosti může být enzymatická reakce prováděna v objemu pouhých 100 µl po dobu 30 minut. Tato vlastnost spolu s použitím neznačeného substrátu zajišťuje nízkou cenu analýzy. Navíc naše výsledky vykazují rozdíl až o dva řády v porovnání s kinetickými parametry získanými pomocí fluorescenčně značených substrátů a publikovanými v literatuře, a to i přesto že inkubační podmínky jsou srovnatelné. Na druhou stranu získané inhibiční parametry dvou inhibitorů vykazují výbornou shodu s daty nalezenými v literatuře. Tyto výsledky byly potvrzeny komplexní kinetickou studií ß-secretasy s využitím různých detekčních technik. |
| Související projekty: |