Informace o publikaci
Isolation of Chromosomes from Picea abies and their Analysis by Flow Cytometry
| Název česky | Izolace chromozómů z Picea abies a jejich analýza pomocí průtokové cytometrie |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2004 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | Biologia Plantarum |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Botanika |
| Klíčová slova | chromosome sorting; chromosome suspensions; flow karyotype; Norway spruce |
| Popis | Poprvé byla vyvinuta vysoce učinná metoda přípravy intaktních chromozomů ze smrku ztepilého [Picea abies (L.) Karst.]. K akumulaci metafází v meristematických buňkách byly rostoucí kořenové špičky máčeny 18hodin v 0,625mM hydroxymočovině, 8hodin v destilované vodě a 8 hodin v 0,05% (m/v) kolchicinu. Bylo dosaženo 50% metafázního indexu. Synchronizované kořenové špičky byly fixovány 10minut v 2% formaldehydu a chromozomy byly uvolněny do lyzačního pufru mechanickou homogenizací - s průměrným výtěžkem 5x100000 chromozómů na 50 kořenových špiček. Izolované chromozómy byly morfologicky intaktní a vhodné pro analýzu průtokovou cytometrií. Flow karyotyp získaný analýzou chromozómů barvených DAPI ukazuje, že je možné třídit poslední tři odlišné chromozomové typy. |