Informace o publikaci
Studium obsahu bromadiolonu u modelových organismů pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2006 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Sborník příspěvků X. pracovního setkání molekulárních biologů a biochemiků |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Analytická chemie, separace |
| Klíčová slova | Study of Bromadiolone content at model organisms by means high performance liquid chromatography with electrochemical detection |
| Popis | ÚVOD: Bromadiolon (3-(3-(4'-brom-1,1'-bifenyl-4-yl)-3-hydroxy-1-fenylpropyl)-4-hydroxy-kumarin) je běžně užívaný rodenticid komerčně dostupný jako Hubex, Lanirat, Tarin, Ratibrom, Ramus, Prorat, atd. Působí jako antikoagulant již ve velmi nízkých koncentracích a jeho účinky jsou kumulativní. Jeho rezidua v přírodě mohou být příčinou úhynu jak domácích, tak volně žijících živočichů, a to nejen přímých, ale i následných konzumentů. Hlavním orgánem podílejícím se na jeho metabolizaci a skladování jsou játra. V naší práci jsme vyvinuli nový způsob jeho detekce založený na použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickým detektorem (HPLC-ED). MATERIÁLY A METODY: Analýza pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí byla provedena na přístroji CoulochemIII (ESA, Inc.). V elektrochemické cele o objemu 50 ul byly umístěna referenční hydrogenpaladiová elektroda, pomocná uhlíková elektroda a pracovní elektroda ze skelného uhlíku. Mobilní fází byla směs fosfátového pufru (pH 7) a methanolu. Separace v reálných vzorcích byla uskutečněna na koloně Polaris C18-A, 150 x 4,6 mm, průměr 3 ľm (Varian, Inc.). VÝSLEDKY A DISKUSE: V našich experimentech jsme se nejdříve zaměřili na studium základního elektrochemického chování bromadiolonu v průtokovém systému. Na základě těchto předběžných výsledků jsme zvolili jako nejvhodnější potenciál aplikovaný na elektrody 600 mV, průtok mobilní fáze 0,4 ml/min, nejvhodnější obsah methanolu v mobilní fázi byl 20%. Zjistili jsme, že námi používaná metoda je rychlá, senzitivní a umožňuje stanovit i stopová množství této látky v živočišných tkáních. Zkoumaným materiálem byly žížaly (Eisenia fetida) chované po dobu 14 dní v přítomnosti 10 granulí přípravku Lanirat Micro v 1 l nádobě s artificiální půdou (OECD 207). Jako kontrola byly použity žížaly chované za stejných podmínek bez přítomnosti rodenticidu. Těmito žížalami (v množství 3 ks na jedince) byli též krmeni hraboši (Microtus arvalis), jejichž játra jsme analyzovali. Jako kontrola sloužila játra hrabošů krmených běžnou krmnou směsí pro hlodavce. ZÁVĚR: Metoda byla optimalizována a následně použita pro stanovení bromadiolonu v biologické matrici živočišného původu. Díky tomuto zjištění jsme schopni rychle a přesně analyzovat bromadiolon například v životním prostředí a tedy podílet se na sledování dopadu jeho působení v přírodě. |
| Související projekty: |