Informace o publikaci
Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells
| Název česky | Srovnávací studie myších a lidských podpůrných buněk pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2008 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | The International journal of developmental biology |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Genetika a molekulární biologie |
| Klíčová slova | hESCs; human embryonic stem cell; growth factor production; undifferentiated growth |
| Popis | Existuje mnoho typů buněk, které používáme jako tzv. "feedrové" (podpůrné) buňky vhodné pro kultivaci lidských embryonálních kmenových buněk (dále jen lidské ES buňky) a jejich funkcí je především zabezpečení ideálních podmínek a faktorů podporujících sebeobnovu a pluripotenci těchto buněk. Buňky podpůrné vrstvy se však liší ve svých schopnostech podporovat růst nediferencovaných lidských ES buněk. V této práci srovnáváme expresi a sekreci čtyř nejznámějších regulátorů pluripotence a/nebo diferenciace u pěti linií lidských fibroblastů a primárních myších embryonálních fibroblastů během standardní kultivace lidských ES buněk. Zjistili jsme, že lidské a myší podpůrné buňky vylučují srovnatelné hladiny TGFbeta1. Myší podpůrné buňky produkují větší množství activinu A než lidské podpůrné buňky. Na druhou stranu FGF-2, který je produkován lidskými podpůrnými buňkami, nebyl detegován v kultivačním médiu z myších fibroblastů. Nedetegovali jsme žádné významné hladiny BMP-4, přestože BMP-4 dimery jsou přítomny u všech typů podpůrných buněk. Produkce růstových faktorů TGFbeta1, activinu A a FGF-2 se u lidských fibroblastů výrazně lišila. Vybrali jsme takové feedrové buňky, které produkovali nejvíc a nejmíň růstových faktorů a hodnotili jsme jejich schopnost podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk. Zjistili jsme, že signifikantně menší proporce lidských ES buněk kultivovaná na lidských podpůrných buňkách exprimovala SSEA3 - jeden z nejvýznamnějších markrů nediferencovaných buněk. Exprese SSEA3 a tím i pluripotence lidských ES buněk můžou být obnoveny přídavkem activinu A. Tyto výsledky naznačují, že schopnost podpůrné vrstvy podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk, je vlastností úzce spojenou s produkcí růstových faktorů. |