Informace o publikaci
Oxidation and Nitrosylation of Cysteines Proximal to the Intermediate Filament (IF)-binding Site of Plectin
| Název česky | Oxidace a nitrosilace cysteinů blízkých k IF vazebnému místu plektinu |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2007 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | The Journal of biological chemistry |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Genetika a molekulární biologie |
| Klíčová slova | Plectin; Nitrosylation; Intermediate Filament |
| Popis | Protein plektin, který váže intermediární vlákna a hraje důležitou úlohu při uchovávání buněčné struktury, často slouží ve stejném okamžiku jako platforma signalizační dráhy. C-koncová doména je strukturně významná a skládá se ze šesti opakujících se sekvencí (R1-6), které obsahují vazebná místa pro různé IF proteiny a proteiny podílející se na přenosu signálu. V závislosti na druhu, plektin obsahuje nejméně 13 cysteinů, z nichž čtyři se nacházejí v doméně R5. Pomocí spektrofotometrické, biochemické a funkční analýzy jsme sledovali strukturní a biologickou funkci mutantu, který obsahoval seriny místo cysteinů. Močovina se používala pro experimenty ukazující, že R5 v oxidované formě (konformace tvořené disulfidovými můstky), byla více strukturně stabilní než u mutanta bez cysteinů. Vazebná afinita R5 domény byla vyšší v okamžiku, kdy protein se nacházel v redukované - více uvolněné formě. Jak bylo prokázáno, jeden ze čtyř R5 cysteinů (cys4) byl zvláště reaktivní, se schopností vytvářet disulfidové můstky s R5 Cys1 a sloužil jako zásahové místo pro nitrosilaci in vitro. Použitím myšší nesmrtelné endoteliální linie buněčné kultury jsme ukázali, že plektin je nitrosilován in vivo a nalezli jsme, že NO vyvolává kolaps IF rychleji v plektin deficientních buňkách, než v buňkách divokého typu. Naše data ukazují antagonistickou roli plektinu pro nitrosilaci (oxidativním stresu) zprostředkovanou změnou IF buněčné struktury a možnou roli R5 Cys4 jako regulačního spínače. |
| Související projekty: |