Development of quantitative sample preparation protocol for targeted metabolome analysis of adenine nucleotides and coenzymes by means of field enhanced sample stacking-capillary zone electrophoresis combination

• Název česky: Kvantitativní příprava vzorku intracelulárních adeninových nukleotidů a koenzymů pro analýzu pomocí CZE
• Autoři: MUSILOVÁ Jindra; SEDLÁČEK Vojtěch; PILÁTOVÁ Kateřina; KUČERA Igor; GLATZ Zdeněk
• Rok publikování: 2008
• Druh: Konferenční abstrakty
• Fakulta / Pracoviště MU: Přírodovědecká fakulta
• Popis: Při studiu mikrobiálních metabolitů je zapotřebí použít nejen vhodnou analytickou metodu, ale i spolehlivý a reprodukovatelný postup pro přípravu vzorku (kultivace biomasy, zhášení metabolismu, extrakce cílových metabolitů,..). Tento úkol je mnohdy velmi nelehký, jelikož intracelulární metabolity jsou chemicky značně odlišné a vyskytují se v buňce v širokém koncentračním rozmezí. K optimalizaci extrakce adeninových nukleotidů (ATP, ADP, AMP) a koenzymů (NAD+, NADH, NADP+ and NADPH) z bakterie Paracoccus denitrificans bylo použito vodných roztoků organických rozpouštědel jako metanol, etanol a acetonitril (100 %, 80 %,50 % a 20 %) a dále směsi acetonitril/metanol/voda (40:40:20), tato směs s přídavkem 0.1 M kys. mravenčí a s přídavkem 0.1 M NH4OH. Výtěžky z extrakcí byly analyzovány na CZE a porovnány mezi sebou.

Související projekty

• Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím
• Monolitické stacionární fáze pro moderní kapalinové separační metody
• Integrované bioanalytické technologie pro mikroanalýzy a diagnostiku s využitím LIF a hmotnostní spektrometrie