Informace o publikaci
Lokalizace spektrinu (spektrinu podobného) proteinu u kvasinek
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2001 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | In IX. Cytoskeletální klub |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Morfologické obory a cytologie |
| Klíčová slova | spectrin; yeast |
| Popis | U kvasinek a protoplastů S. cerevisiae a Sch. japonicus var. versatilis byla zjišťována přítomnost spektrinu, charakteristického proteinu membránového skeletu živočišných buněk. Imunoanalýza hrubého extraktu buněčných proteinů z obou druhů kvasinek pomocí 4 anti-spektrinových protilátek (dvě polyklonální a dvě monoklonální) ukázala přítomnost dvojitého proužku v oblasti kolem 85 kDa. Reakce byla obdobná u obou kvasinek. K určení bližší lokalizace tohoto proteinu v buňkách byla použita nepřímá immunofluorescence. Nejintenzivnější fluorescence bylo dosaženo při aplikaci anti-kuřecí spektrinové protilátky (S 1390; Sigma). Intenzita fluorescence kvasinek byla srovnatelná s lidskými erytrocyty. U obou typů buněk a také u protoplastů, jak čerstvých tak rostoucích, byla fluorescence lokalizována pod buněčným povrchem. U S. cerevisiae a protoplastů obou kvasinek fluoreskoval i povrch vakuoly. U buněk Sch. versatilis byla značena také oblast septa. Ostatní testované protilátky vykazovaly jen slabou fluorescenci v podobě teček pod celým povrchem buněk a protoplastů. Nepozorovali jsme výraznější fluktuaci fluorescence za různých metabolických stavů buňky nebo růstových zónách. Přítomnost tohoto proteinu u čerstvých protoplastů prokazuje, že fluorescence není vázána na buněčnou stěnu, ale na plasmatickou membránu. Mimo plasmamembrány fluoreskují rovněž i vakuoly, což odpovídá lokalizaci spektrinu u jiných buněk (1, 2). Malá velikost proteinu (kolem 85 kDa) je v kontrastu s udávanou velikostí erytrocytárního spektrinu (220-240 kDa), což může být důsledkem degradace molekul spektrinu (fragmenty původně velké molekuly) nebo se u kvasinek vyskytuje redukovaná forma spektrinu. Vyloučena není ani reakce anti-spektrinové protilátky s jinými proteiny spektrinové rodiny, které se mohou u kvasinek také vyskytovat. Obdobné výsledky byly pozorovány i v rostlinných buňkách (85 kDa protein, cit. 1) a u Neurospory (100 kDa protein, cit. 3). |
| Související projekty: |